2020年3月13日,国家知识产权局公开了由安徽省农业科学院水稻研究所许蓉芳、李娟、秦瑞英、刘小双、单调风、廖圣祥、魏鹏程等人发明设计的专利-一种高效的宽窗口单碱基编辑基因及其应用和育种方法。
该发明提供了一种高效的单碱基编辑系统OsSpCas9‑eCDA及其应用和育种方法。该发明通过大量的实验,尝试采用不同的方式对SpCas9‑ABE进行改造,终于成功获得了一个高单碱基编辑效率、宽窗口的CP1249‑OsSpCas9‑eABE编辑器。并且本发明还提供了包含该CP1249‑OsSpCas9‑eABE基因的表达盒和一种表达载体,以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。该发明利用设计的CP1249‑OsSpCas9‑eABE基因构建植物表达载体,进而构建水稻打靶载体,导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换,特别是实现由A/T碱基突变成C/G。利用该编辑器进行水稻基因编辑,可以编辑更多的突变体,获得更多的随机突变或者得到突变更多的突变体库。
附图:
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